Protein Chromatography: Methods and Protocols

یک پیش نیاز برای توضیح ساختار و عملکرد هر پروتئین، خالص سازی قبلی آن پروتئین است. این ضرورت منجر به توسعه بسیاری از طرح‌های خالص‌سازی و روش‌های کروماتوگرافی برای جداسازی پروتئین‌های بومی از منابع پیچیده شده است. در کروماتوگرافی پروتئینی: روش‌ها و پروتکل‌ها، محققان پیشرو فصل‌هایی به سبک پروتکل روشن ارائه می‌کنند که برای تازه واردان و متخصصان مناسب است. این کتاب با موضوعات حیاتی در بیوشیمی پروتئین آغاز می‌شود، و به حوزه‌هایی مانند پایداری و ذخیره‌سازی پروتئین، اجتناب از پروتئولیز در طول کروماتوگرافی، روش‌های کمی‌سازی پروتئین از جمله immuno-qPCR، و چالش‌های متضادی که میکروسیال‌ها و تولید افزایش‌یافته برای محقق ایجاد می‌کند، می‌پردازد. این روش شامل روش‌های کلیدی شامل تولید و خالص‌سازی پروتئین‌های نوترکیب از طریق تولید آنتی‌بادی نوترکیب و برچسب‌گذاری پروتئین‌ها، از جمله روش‌های دیگر، و همچنین تغییرات بسیاری در تکنیک‌های کلاسیک مانند تبادل یونی و کروماتوگرافی ایمنی می‌شود. فصل‌های پروتکل‌ها که در قالب‌های بسیار موفق سری Methods in Molecular Biology™ نوشته شده‌اند، شامل مقدمه‌ای در مورد موضوعات مربوطه، فهرستی از مواد و معرف‌های لازم، پروتکل‌های آزمایشگاهی گام به گام، قابل تکرار آسان و نکاتی در مورد عیب‌یابی و اجتناب از مشکلات شناخته شده است. کروماتوگرافی پروتئینی معتبر و به‌روز: روش‌ها و پروتکل‌ها به دانشمندان کمک زیادی می‌کند تا این تکنیک‌های ضروری را در آزمایشگاه‌های خود ایجاد کنند و درک ما را از بسیاری از عملکردهای ضروری پروتئین‌ها بیشتر کنند.

A prerequisite for elucidating the structure and function of any protein is the prior purification of that protein. This necessity has led to the development of many purification schemes and chromatographic methods for the isolation of native proteins from complex sources. In Protein Chromatography: Methods and Protocols, leading researchers present clear protocol-style chapters that are suitable for newcomers and experts alike. The book opens with vital topics in protein biochemistry, addressing such areas as protein stability and storage, avoiding proteolysis during chromatography, protein quantitation methods including immuno-qPCR, and the contrasting challenges that microfluidics and scale-up production pose to the investigator, and then it segues into key methods involving the generation and purification of recombinant proteins through recombinant antibody production and the tagging of proteins, amongst other means, as well as many variations on classic techniques such as ion-exchange and immunoaffinity chromatography. Written in the highly successful Methods in Molecular Biology™ series format, protocols chapters include introductions to their respective subjects, lists of the necessary materials and reagents, step-by-step, readily reproducible laboratory protocols, and tips on troubleshooting and avoiding known pitfalls. Authoritative and up-to-date, Protein Chromatography: Methods and Protocols will greatly aid scientists in establishing these essential techniques in their own laboratories and furthering our understanding of the many imperative functions of proteins.